海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒

商品詳情：
測定意義：

海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖，是由兩個葡萄糖分子組成的一個非還原性雙糖，能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細胞表面形成的保護膜，有效地保護生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞，從而維持生命體的生命過程和生物特征。

植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖，海藻糖-6-磷酸酯酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP)是該途徑中海藻糖合成關(guān)鍵酶之一，該反應首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase，TPS)的作用下?杈?

測定原理：

TPP催化海藻糖-6-磷酸產(chǎn)生海藻糖，同時釋放出磷酸根，使用鉬銻抗比色法測定。

需自備的儀器和用品：  

酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。

2.細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3.血清等液體：直接檢測。

計算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應體系總體積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細菌或細胞總數(shù)，2000萬。

Spacemaker蛋白ELISA試劑盒 SPAM免費代測試劑

Sp100核抗原ELISA試劑盒 Sp100免費代測試劑

Snurportin1蛋白ELISA試劑盒 SNUPN1免費代測試劑

Snail同源物1ELISA試劑盒 SNAI1免費代測試劑

Smoothened蛋白ELISA試劑盒 SMO免費代測試劑

Smad同源物4ELISA試劑盒 Smad4免費代測試劑

Slingshot同源物3ELISA試劑盒 SSH3免費代測試劑

Slingshot同源物2ELISA試劑盒 SSH2免費代測試劑

Slingshot同源物1ELISA試劑盒 SSH1免費代測試劑

Sideroflexin5蛋白ELISA試劑盒 SFXN5免費代測試劑

Sideroflexin4蛋白ELISA試劑盒 SFXN4免費代測試劑

Sideroflexin3蛋白ELISA試劑盒 SFXN3免費代測試劑

Sideroflexin2蛋白ELISA試劑盒 SFXN2免費代測試劑

Shootin1蛋白ELISA試劑盒 Shootin1免費代測試劑

Shisa同源物5ELISA試劑盒 SHISA5免費代測試劑
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒20T/10樣NADPH氧化酶活性測試盒/比色法

50管/48樣NADP磷酶(NADPase)測試盒/分光光度法

100管/96樣NADP磷酶(NADPase)測試盒/微量法

50管/48樣NADP蘋果酶(NADP-ME)測試盒/分光光度法

100管/96樣NADP蘋果酶(NADP-ME)測試盒/微量法

50管/48樣NADP-蘋果脫氫酶(NADP－MDH)測試盒/分光光度法

100管/96樣NADP-蘋果脫氫酶(NADP－MDH)測試盒/微量法

50T/24樣NAD激酶(NADK)測試盒/比色法

50管/24樣NAD激酶(NADK)測試盒/分光光度法
注意事項：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準確性，需先取1-2個樣做預實驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。